牛津杯的作用原理和具體操作方法

　　牛津杯采用優質的不銹鋼制成，主要是作為瓊脂擴散使用，它的兩端平整光滑，結合性好，不易變形。利用有一定體積的不銹鋼制的小管(牛津杯)，將抗生素溶液裝滿小杯，并在含有敏感試驗菌的瓊脂培養基上進行擴散滲透，經過一定時間后，抗生素擴散到適當的范圍，產生透明的抑菌圈。抑菌圈的半徑與抗生素在管中的總量(單位)、抗生素的擴散系數(cm2/h)、擴散時間(即抗生素溶液注入鋼管至出現抑菌圈所需的時間)、培養基的厚度(mm)和低抑菌濃度(u/mL)等因素有關?？股乜偭康膶岛鸵志χ睆降钠椒匠手本€關系。因此，抗生素效價可以由抑菌圈的大小來衡量。
 

　　將培養基平板置培養箱中培養，一方面試驗菌(指示菌)開始生長繁殖；另一方面抗生素呈球面擴散，形成遞減的梯度濃度，離杯越近，抗生素濃度越大，離杯越遠抗生素濃度越小。在牛津杯周圍抑菌濃度范圍內的細菌的生長被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度(藥敏實驗)或藥物對指示細菌的抑菌程度(抑菌試驗)?？股貪舛仍礁?，抑菌圈越大。具體操作如下：
 

　　1.倒底層平板：將滅菌的瓊脂水底層培養基加熱融化后，冷涼至55～50℃左右，傾倒入培養皿制成底層平板，將圓形小管豎直立在已經凝固的不含營養物質的瓊脂凝膠平板(下層板)上。
 

　　2.制備混菌上層平板：將檢測用上層培養基加熱融化后，冷涼至55℃左右，上層培養基加入指示菌，輕輕搖勻。在每一培養皿底層平板上加入上層培養基，凝固后成上層平板備用。也就是這一過程中向圓形小管周圍倒入混有指示菌的培養基(上層板)，待培養基完全凝固后用鑷子將圓形小管取出。
 

　　3.用移液器向牛津杯制造的小孔中分別加入待測物和對照液，培養一段時間后，測量小孔周圍抑菌圈的大小，可反映出待測菌抑菌活性的大小。